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    YAC 克隆的分析實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)庫(kù) 參考來(lái)源：

    發(fā)布時(shí)間： 2021-12-24　　點(diǎn)擊次數(shù)： 982次

    材料與儀器


    酵母菌
    AHC YPD 甘油
    培養(yǎng)箱 冷凍管


    步驟


    1.  用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長(zhǎng)出1~3 mm 大小的紅色菌落為止。

    2.  短期保存：用Parafilm膜將平板周圍封起來(lái)，于4℃可保存4~6周。

    3.  長(zhǎng)期保存：接種一個(gè)單獨(dú)的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培養(yǎng)基中，在30℃搖床過(guò)夜，然后加入1 ml 80%甘油，混勻，再分成0.2~1.0  ml 小份將甘油/菌懸液移至冷凍管中，-80℃保存。


    同實(shí)驗(yàn)其他方法

    制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    1.  接種一個(gè)紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培養(yǎng)基的250 ml 三角燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)搖床上30℃ 250 r/min 振蕩培養(yǎng)24 h。   2.  擴(kuò)大

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