細胞培養(yǎng)中究竟要不要加抗生素？

簡介： 

  提到細胞污染，大家想到較多的是細胞中的細菌、渾濁的培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶中的非法入侵者等。此外，病毒和化學(xué)污染對細胞培養(yǎng)物的健康也非常重要，確保細胞株不存在交叉污染也是獲得可重復(fù)結(jié)果的關(guān)鍵因素。

控制污染的關(guān)鍵是如何檢測出污染。

  細菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見的，或許能迅速殺死細胞，但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測到。相比之下，傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡無法檢測到病毒，因此病毒污染通常是在觀察到無法解釋的分離、細胞健康較差的其他跡象或甚至是細胞死亡時才被發(fā)現(xiàn)的。

總結(jié)：

抗生素雖然減少了可以觀察到的細菌、酵母等微生物的污染機會，卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機會。

因為細胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時攜帶支原體、病毒和其他微生物。當抗生素使用時，可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到，這樣支原體、病毒等隱性污染的機會反而增加了。Barile的一項研究顯示72%持續(xù)使用抗生素培養(yǎng)的細胞有支原體污染，而不使用抗生素培養(yǎng)的細胞支原體污染的比例只有7%

反過來如果不使用抗生素，支原體、病毒的污染往往會伴隨細菌和酵母等的污染。由于細菌和酵母等的污染很容易觀察到，污染細胞的及時清理就大大減少了支原體、病毒的污染機會。

潛在的支原體、病毒的污染會帶來很大的危害。這些微生物的存在會影響細胞的理化性質(zhì)，從而使研究者得到錯誤的實驗結(jié)果。在嚴重的情況下，甚至使一個實驗室數(shù)年的研究白白浪費。

由于過濾技術(shù)的提高和超凈臺質(zhì)量的改進，在規(guī)范的細胞培養(yǎng)操作過程中引進污染的機會已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規(guī)的細胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多（比如組織培養(yǎng)），或者培養(yǎng)非常珍貴的細胞株時才使用抗生素。

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