實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)！盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)構(gòu)建小鼠膿毒癥

什么是膿毒癥？

膿毒癥（Sepsis）是宿主對感染的反應(yīng)失調(diào)而引起的危及生命的器官功能障礙。膿毒癥可以由任何部位的感染引起，是嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克、感染和外科大手術(shù)等常見的并發(fā)癥，病死率較高。

目前針對膿毒癥的治療仍然沒有相應(yīng)的特別效果的藥物。疾病模型的建立有助于人們更好地探討膿毒癥的發(fā)病機(jī)制和尋找有效的治療措施，獲得更早的診斷并采取干預(yù)措施，從而改善膿毒癥患者的預(yù)后。

盲腸結(jié)扎穿孔模型是最臨近于人類膿毒癥機(jī)制的模型，被稱為膿毒癥模型的“金標(biāo)準(zhǔn)"。該模型通過結(jié)扎并穿孔盲腸，使混有多種細(xì)菌的腸內(nèi)容物持續(xù)溢入腹腔，從而模擬細(xì)菌性腹膜炎的臨床特點(diǎn)。當(dāng)細(xì)菌轉(zhuǎn)移進(jìn)入血液時(shí)，會誘發(fā)全身性炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致多器官衰竭和死亡。

方法：

1.BALB/c雄性小鼠（6-8周） 小鼠

2.適應(yīng)性喂養(yǎng)1周

3.禁食12小時(shí)

4.麻醉（腹腔注射1%CHN?NaO?）

5.左下腹剃毛，消毒并用鑷子拉出盲腸

6.手術(shù)縫線結(jié)扎75%的盲腸

7.擠出適量腸內(nèi)容物，縫合

8.皮下注射預(yù)溫37°C無菌生理鹽水(1 mL)

具體步驟：

選擇6-8周BALB/c雄性小鼠，適應(yīng)環(huán)境一周，禁食12 h后腹腔注射1%（CHN?NaO?）麻醉。左下腹剃毛，碘伏消毒，開一小口（1 cm左右），用鑷子輕輕將盲腸拉出，用不能吸收的3-0手術(shù)縫線結(jié)扎75%的盲腸，用21號針頭穿孔，從穿刺處擠出適量腸內(nèi)容物，再將盲腸放回腹腔，分別縫合腹膜和皮膚。小鼠皮下注射預(yù)溫37℃無菌生理鹽水（1 mL）進(jìn)行液體復(fù)蘇。

Tips:

(1) 小鼠盲腸一般在其左下腹；

（2）結(jié)扎長度是模型死亡率的主要決定因素；結(jié)扎75%或以上的盲腸，為重度膿毒癥（生存率為0%），結(jié)扎50%的盲腸，為中度膿毒癥（生存率約為40%）。

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