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    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

    發(fā)布時(shí)間: 2024-04-29  點(diǎn)擊次數(shù): 495次

    支原體是什么?如何判斷細(xì)胞是否被支原體感染?如果感染了,細(xì)胞應(yīng)該如何處理?

    以上三個(gè)問題,大多數(shù)養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué)都會(huì)遇到,我們今天就講一下支原體污染的問題。

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?


    支原體,是一種沒有細(xì)胞壁結(jié)構(gòu),在獨(dú)立生活和細(xì)胞內(nèi)寄生之間存活的原核生物,其結(jié)構(gòu)和典型的細(xì)菌相近。

    部分支原體可以致病,例如肺部支原體。由于支原體沒有細(xì)胞壁,許多常見的抗生素,如青霉素對(duì)其沒有殺傷力。

    和常見的細(xì)菌污染不同,細(xì)胞被支原體污染后,采用常規(guī)顯微鏡無法直接在明場視野下看到支原體,后者也并不會(huì)直接破壞宿主細(xì)胞結(jié)構(gòu),而是改變細(xì)胞的代謝。

    所以,細(xì)胞往往表現(xiàn)出生長狀態(tài)變差,例如生長緩慢,不像細(xì)菌污染那樣大量死亡。因此,被支原體污染的細(xì)胞是很難察覺出異樣的。

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

    那么,如何判斷細(xì)胞是否被支原體污染呢?

    常用的方法有熒光染色、PCR、ELISA、免疫染色、放射自顯影以及微生物學(xué)分析。

    對(duì)于大多數(shù)同學(xué)而言,最簡的辦法,應(yīng)該是采用熒光染色。具體來說,就是使用Hoechst 33258對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色。

    其原理是被染色后的細(xì)胞,在50X或100X目鏡下觀察,可以看到細(xì)胞核呈藍(lán)色熒光,細(xì)胞內(nèi)染色質(zhì)上有明確的藍(lán)色熒光微粒或絲狀物,后者就是支原體的標(biāo)志特征。

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

    動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 第7版 配圖

    使用Hoechst 33258進(jìn)行染色的實(shí)驗(yàn)方法見下圖(參考資料:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 第7版。

    如果實(shí)驗(yàn)室有條件的同學(xué),也可以直接購買商業(yè)化的檢測試劑盒,這樣會(huì)更加方便和高效。

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

    我們之前講過,如果細(xì)胞被微生物污染,例如細(xì)菌,那么應(yīng)該直接把被污染的細(xì)胞清理掉,而不是嘗試挽救。

    同理,當(dāng)細(xì)胞被確認(rèn)感染了支原體后,第一選擇的處理措施依然也是清理掉污染的細(xì)胞。

    除非該細(xì)胞非常重要,或無法替代,此時(shí)我們可以嘗試去除支原體污染。以下,我們也為大家分享支原體清除的實(shí)驗(yàn)操作建議。(參考資料:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 第7版)

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

    細(xì)胞被支原體污染怎么辦?

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