細(xì)胞培養(yǎng)常遇問(wèn)題集錦（十七）

細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題集錦第十七期，小編會(huì)繼續(xù)收集相關(guān)問(wèn)題，每期都為大家更新5個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)中遇到的問(wèn)題并解答~

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▲問(wèn)：hepg2細(xì)胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒(méi)有吹開(kāi)的細(xì)胞？是不是念珠菌感染？出不來(lái)形態(tài)，吹不勻。

答：肝癌就是這樣，很容易坨，肝癌會(huì)有一個(gè)聚集成團(tuán)，一片一片的clone，也會(huì)成聚集，推薦是帶丙酮酸鈉的MEM。

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問(wèn)：細(xì)胞培養(yǎng)中加入biotin有什么作用呢？

答：是為了促進(jìn)細(xì)胞增殖。

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▲問(wèn)：細(xì)胞轉(zhuǎn)了敲低基因的病毒之后，為什么總會(huì)出現(xiàn)一些比細(xì)胞還要亮的，碎片樣的東西，或者圓形的東西呢？

答：基因的表達(dá)包括 GFP用，都會(huì)用泊松分布Poisson distribution的形式出現(xiàn)， 有些細(xì)胞有多一點(diǎn)GFP的表達(dá), 有些少的。圓形的細(xì)胞是因?yàn)榛虻鞍妆磉_(dá)較高 ，所以熒光蛋白表達(dá)都高。

▲問(wèn)：這種很亮的碎片呢？感覺(jué)他不像是細(xì)胞的樣子！

答：細(xì)胞開(kāi)始細(xì)胞凋亡，可能是凋亡小體，可用DAPI。

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問(wèn)：細(xì)胞剛復(fù)蘇都是亮亮的圓點(diǎn)是什么原因？之前復(fù)蘇長(zhǎng)得很快。

答：是不是還沒(méi)貼壁？

問(wèn)：之前兩天都長(zhǎng)滿貼壁了，這次也兩天了只有一點(diǎn)細(xì)胞貼壁。

答：復(fù)蘇率不高，是不是沒(méi)凍好？

問(wèn)：之前別人凍的，需要重新復(fù)蘇嗎？

答：如果培養(yǎng)基和血清養(yǎng)別的沒(méi)問(wèn)題，那不太可能是營(yíng)養(yǎng)體系問(wèn)題。可能是凍存環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，傳代后不會(huì)有好轉(zhuǎn)，看看細(xì)胞能增殖出來(lái)不，增殖不出來(lái)就需要重新復(fù)蘇了。

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▲問(wèn)：請(qǐng)問(wèn)上面三個(gè)圖里，細(xì)胞是染菌了嗎？昨天給單獨(dú)加了100ul過(guò)濾的bi血清。

答：從照片上看黑點(diǎn)的形態(tài)高倍數(shù)放大是球菌，低倍數(shù)放大它們是立體聚集在一起，疑似是葡萄球菌。平面聚集的是鏈球菌。

問(wèn)：黑點(diǎn)是不會(huì)動(dòng)的，用三抗可以嗎，還有救嗎？

答：細(xì)胞還有庫(kù)存的話建議重新復(fù)蘇，因?yàn)榧?xì)胞感染了，去除要花多些時(shí)間。

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