RAW264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

一、產(chǎn)品說(shuō)明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包裝規(guī)格

貨號(hào)：AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格：0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、儲(chǔ)存條件

常溫運(yùn)輸，4℃保存，可保存兩年，拒絕反復(fù)凍融。

二、RAW264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染質(zhì)粒8100bp效果圖和轉(zhuǎn)染條件

轉(zhuǎn)染條件

質(zhì)粒DNA大?。?100bp

培養(yǎng)板：6孔板

轉(zhuǎn)染試劑用量：6ul

質(zhì)粒DNA用量：電訊

轉(zhuǎn)染試劑：Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染時(shí)間：48小時(shí)

血清：Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

細(xì)胞凍存：CE70100T無(wú)血清細(xì)胞凍存液

三、RAW264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑操作步驟：

材料準(zhǔn)備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無(wú)菌雙蒸水或超純水；②無(wú)內(nèi)毒素 ）

提前 1 天接種細(xì)胞：細(xì)胞匯合度在 60-80%左右，再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻，室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物：根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物，并輕輕混勻；細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細(xì)胞換液：轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正常換液，懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

分析結(jié)果：質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時(shí)后熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，48-96 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。若 進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選，則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時(shí)熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，48-72 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。

深圳市安培生物科技有限公司是美國(guó) Zeta Life 公司的中國(guó)代理商。Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑大量現(xiàn)貨，均經(jīng)過反復(fù)充分驗(yàn)證，轉(zhuǎn)染效果好且重復(fù)性佳，提供完整售后服務(wù)和技術(shù)支持。尊敬的客戶您如在訂購(gòu)過程中遇到任何問題都可以與我司客戶經(jīng)理聯(lián)系尋求幫助。