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髓系來(lái)源抑制性細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑
更新時(shí)間:2024-06-26
訪問(wèn)量:1372
廠商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:美國(guó)
一、產(chǎn)品說(shuō)明:
1、產(chǎn)品名稱(chēng)
Advanced DNA RNA Transfection Reagent
2、包裝規(guī)格
貨號(hào):AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150
規(guī)格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml
3、儲(chǔ)存條件
常溫運(yùn)輸,4℃保存,可保存兩年,拒絕反復(fù)凍融。
二、髓系來(lái)源抑制性細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑突出表現(xiàn):
1、Zeta Life多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑的尺寸大小是傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑體積的1/10;
2、本轉(zhuǎn)染試劑是通過(guò)細(xì)胞主動(dòng)吞噬吸收進(jìn)入細(xì)胞;
3、本轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)入后對(duì)細(xì)胞膜無(wú)物理性損傷,不易出現(xiàn)細(xì)胞變形,保持高的細(xì)胞活力;
4、不激活細(xì)胞表面或細(xì)胞體內(nèi)marker;
5、可反映真實(shí)的細(xì)胞通路蛋白原始數(shù)據(jù);
6、可轉(zhuǎn)染免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等。
三、操作流程
提前 1 天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在 60-80%左右,再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。
在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。
細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程中不用換液。
分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時(shí)后熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。若 進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時(shí)左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時(shí)熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時(shí)檢測(cè) mRNA 或蛋白表達(dá)。
四、髓系來(lái)源抑制性細(xì)胞高效轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效果
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